Soroprevalência de brucelose em suínos de granjas comerciais e em criatórios de subsistência / Seroprevalence of brucellosis in farm animals and in subsistence breeders

A suinocultura industrial compreende o conjunto de produtores que incorporam os avanços tecnológicos em genética, nutrição, sanidade e demais aspectos produtivos, enquanto a suinocultura de subsistência desempenha um papel importante para a alimentação humana, sendo a criação de suínos em criatórios amplamente difundida entre os pequenos proprietários de terra ou em assentamentos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a pesquisa de anticorpos contra Brucella sp. nos suínos de granjas comerciais, criatórios de subsistência e javalis asselvajados. Foram visitados 32 criatórios de suínos domésticos localizados na região sul de Mato Grosso do Sul. Considerando-se os fenótipos, verificou-se que os sinais indicativos de contato têm influência do município onde está situada a propriedade (χ2=8.8594, p=0,0029), sendo que o município de Deodápolis tem uma chance de ocorrência mais elevada (OR=13,00;IC95%:2,12-79,59). Através da detecção fenotípicaobserva-sea presença de animais híbridos nas propriedades analisadas, e evidencia-se assim que os animais da propriedade em algum momento entraram em contato com suínos asselvajados, os quais podem ser responsáveis pela disseminação de diversas patologias. A ausência da detecção de anticorpos anti-Brucella sp. em suínos de criatórios sugere que a bactéria não é circulante nas populações de javalis nas áreas de estudo.

Industrial pig farming comprises the group of producers that incorporate technological advances in genetics, nutrition, health and other productive aspects, while subsistence pig farming plays an important role for human nutrition, with the creation of pigs in farms being widely spread among small farms. landowners or settlements. This study aimed to evaluate the search for antibodies against Brucella sp. pigs on commercial farms, livestock farms and wild boars. Were visited 32 domestic swine farms located in the southern region of Mato Grosso do Sul. Considering the phenotypes, it was found that the indicative signs of contact have influence from the municipality where the property is located (χ2=8.8594, p=0.0029) , and the municipality of Deodápolis has a higher chance of occurrence (OR=13,00;IC95%:2,12-79,59). Through the phenotypic detection, the presence of hybrid animals in the analyzed properties is clearly observed, and it is evident that the animals of the property at some point came into contact with pigs, which may be responsible for the spread of several pathogens. The absence of detection of anti-Brucella sp. in breeding pigs it suggests that the bacteria is not circulating in wild boar populations in the study areas.

Soroprevalência de brucelose em suínos de granjas comerciais e em criatórios de subsistência / Seroprevalence of brucellosis in farm animals and in subsistence breeders

A suinocultura industrial compreende o conjunto de produtores que incorporam os avanços tecnológicos em genética, nutrição, sanidade e demais aspectos produtivos, enquanto a suinocultura de subsistência desempenha um papel importante para a alimentação humana, sendo a criação de suínos em criatórios amplamente difundida entre os pequenos proprietários de terra ou em assentamentos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a pesquisa de anticorpos contra Brucella sp. nos suínos de granjas comerciais, criatórios de subsistência e javalis asselvajados. Foram visitados 32 criatórios de suínos domésticos localizados na região sul de Mato Grosso do Sul. Considerando-se os fenótipos, verificou-se que os sinais indicativos de contato têm influência do município onde está situada a propriedade (χ2=8.8594, p=0,0029), sendo que o município de Deodápolis tem uma chance de ocorrência mais elevada (OR=13,00;IC95%:2,12-79,59). Através da detecção fenotípicaobserva-sea presença de animais híbridos nas propriedades analisadas, e evidencia-se assim que os animais da propriedade em algum momento entraram em contato com suínos asselvajados, os quais podem ser responsáveis pela disseminação de diversas patologias. A ausência da detecção de anticorpos anti-Brucella sp. em suínos de criatórios sugere que a bactéria não é circulante nas populações de javalis nas áreas de estudo.

Industrial pig farming comprises the group of producers that incorporate technological advances in genetics, nutrition, health and other productive aspects, while subsistence pig farming plays an important role for human nutrition, with the creation of pigs in farms being widely spread among small farms. landowners or settlements. This study aimed to evaluate the search for antibodies against Brucella sp. pigs on commercial farms, livestock farms and wild boars. Were visited 32 domestic swine farms located in the southern region of Mato Grosso do Sul. Considering the phenotypes, it was found that the indicative signs of contact have influence from the municipality where the property is located (χ2=8.8594, p=0.0029) , and the municipality of Deodápolis has a higher chance of occurrence (OR=13,00;IC95%:2,12-79,59). Through the phenotypic detection, the presence of hybrid animals in the analyzed properties is clearly observed, and it is evident that the animals of the property at some point came into contact with pigs, which may be responsible for the spread of several pathogens. The absence of detection of anti-Brucella sp. in breeding pigs it suggests that the bacteria is not circulating in wild boar populations in the study areas.

Risk of exposure of farms and subsistence nurseries to contact with wild boar in southern Mato Grosso do Sul / Risco de exposição de granjas e criatórios de subsistência ao contato com javalis no sul do Mato Grosso do Sul

With the advancement of wild boar distribution in the rural environment, its impacts are not limited to health in the pig sector, but the requirements for monitoring and control of the species are requirements laid down by the OIE for the recognition of classical swine fever free zone status. The construction of ecological models of favorability or suitability for the occurrence of pest species are necessary tools for the decision making on priority areas of management aiming at risk management. This work aims to map the level of suitability for the occurrence of wild boar in the southern state of Mato Grosso do Sul, as well as to identify the main risk variables for contact with the wild boar and evaluate the biosecurity measures adopted by commercial farms integrated in the south of the State of Mato Grosso do Sul. To evaluate the risk potential of wild boar for commercial and subsistence swine farming in southern Mato Grosso do Sul, a model of environmental suitability was constructed for this species in the swine producing region. This model considered different environmental strata, being the selection of the layers considered the physiological and behavioral characteristics of the species. In parallel, interviews were carried out in a sample of commercial farms integrating the region to survey the perception of the presence of the invasive species and the biosafety measures adopted. The results of this work indicate that the risk of contact among wild boars and animals reared in closed production systems may be high in the study area and only establishment of appropriate biosecurity measures that consider the characteristics and habits of the boar may prevent the intrusion of this species and contact with domestic swine. The built model can be considered of high reliability and it is recommended to apply it to other areas of the state, being a useful tool for the productive sector, environmental agencies and decision makers.(AU)

Com o avanço da distribuição do javali no ambiente rural, seus impactos não se restringem somente a sanidade suidea, embora as exigências quanto ao monitoramento e controle da espécie sejam exigências previstas pela OIE, para o reconhecimento do status de zona livre de peste suína clássica. A construção de modelos ecológicos de favorabilidade ou adequabilidade para a ocorrência de espécies-praga são ferramentas necessárias para as tomadas de decisão sobre áreas prioritárias de manejo visando gestão de risco. Este trabalho objetiva mapear o nível de adequabilidade para a ocorrência de javalis no sul do Estado de Mato Grosso do Sul, bem como levantar as principais variáveis de risco para o contato com o javali asselvajado e avaliar as medidas de biosseguridade adotadas por granjas comerciais integradas no sul do Estado do Mato Grosso do Sul. Para avaliar o potencial de risco exercido pelos javalis para a suinocultura comercial e de subsistência nesta região foi construído um modelo de adequabilidade ambiental para essa espécie na região produtora de suínos. Esse modelo considerou diferentes estratos ambientais, sendo que para a seleção das camadas consideram-se características fisiológicas e comportamentais da espécie. Em paralelo, entrevistas foram realizadas em uma amostragem de granjas comerciais de integração da região para levantamento da percepção quanto a presença da espécie invasora e as medidas de biossegurança adotadas. Os resultados desse trabalho indicam que o risco de contato entre javalis de vida livre e os animais criados em sistemas de produção fechados pode ser alto na área de estudo e somente estabelecimento de medidas de biosseguridade apropriadas, que considerem as características e hábitos do javali poderá impedir a intrusão dessa espécie e o contato com os suínos domésticos. O modelo construído pode ser considerado de elevada confiabilidade e recomenda-se a sua aplicação para as outras áreas do estado, sendo uma ferramenta útil para o setor produtivo, os órgãos ambientais e os tomadores de decisão.(AU)

Reproductive performance of Nellore heifers raised in extensive system undergoing different vaccination protocols in fixed-time artificial insemination (FTAI) / Desempenho reprodutivo de novilhas Nelore criadas em sistema extensivo no Pantanal, submetidas a diferentes protocolos vacinais na Inseminação Artificial em tempo Fixo (IATF)

ABSTRACT: This study evaluated the reproductive performance of Nellore heifers without previous vaccination undergoing fixed-time artificial insemination (FTAI) and subsequent natural breeding under different vaccination protocols against infectious bovine herpesvirus 1 (BHV-1), bovine viral diarrhea virus (BVDV), and bovine leptospirosis (BL). A total of 763 animals were included; the group assignment was as follows: T1, control without vaccination; T2, vaccination against BL; T3, vaccination against BHV-1and BVDV; T4,vaccination against combination of BL + BHV-1and BVDV. Vaccination was started 30 days before FTAI (D-40), and a booster dose was administered at D-10. Serological tests were used to verify the occurrence rate of natural infection by BL, BHV-1, and BVDV. Initial pregnancy was diagnosed at D30, D60, and D120 after FTAI. Final pregnancy rates were evaluated by group, weight, body-condition score, occurrence of estrus, inseminator, bull, and occurrence of abortions or embryonic death. In all groups, results indicated seropositivity of 100% for leptospirosis, 77.0-94.0% for BHV-1, and 64.0-87.0% for BVDV. The vaccination protocol was not a significant influencing factor of pregnancy rate and embryonic or fetal mortality; whereas, animal weight at the beginning of the breeding season and presence of estrus at FTAI were significant influencing factors of pregnancy rate. The vaccination protocol had no interference with the reproductive performance of the experimental groups.

RESUMO: O estudo foi conduzido para avaliar o desempenho reprodutivo de novilhas Nelore, não imunizadas para herpesvirus bovino tipo 1 (BHV-1), vírus da diarreia viral bovina (BVDV) e leptospirose bovina (LB), submetidas a diferentes protocolos vacinais em manejo de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) e repasse com touro em monta natural. Um total de 763 animais foram distribuídos em quatro grupos: T1 - controle sem vacinação; T2 - vacinação contra LB; T3 - vacinação contra BHV-1 e BVDV T4 - vacinação com LB+ BHV-1 e BVDV. A vacinação foi iniciada 30 dias antes da IATF (D-40) com a aplicação da segunda dose em D-10. Verificou-se a taxa de ocorrência de infecção natural por LB, BHV-1 e BVDV realizando-se exames sorológicos. O diagnóstico de gestação inicial foi feito aos 30, 60 e 120 dias. Avaliou-se as taxas de prenhez em função dos grupos, do peso, escore de condição corporal, presença ou ausência de cio, inseminador, touro, ocorrência de abortos ou morte embrionária. Os resultados obtidos revelaram que soropositividade para leptospirose foi de 100% para todos os grupos, variando de 77,0% a 94,0% para BHV-1 e 64,0% a 87,0% para BVDV. O protocolo vacinal não interferiu na taxa de prenhez, de mortalidade embrionária ou fetal. Houve diferença na taxa de prenhez em relação ao peso dos animais no início da estação reprodutiva e a presença de cio no momento da IATF. Concluiu-se que o protocolo vacinal não interferiu no desempenho reprodutivo dos grupos experimentais.

Prevalência de leptospirose em rebanhos bovinos no Pantanal de Mato Grosso do Sul / Prevalence of leptospirosis in cattle herds in the Pantanal of Mato Grosso do Sul

Foi realizado um estudo epidemiológico da leptospirose em fêmeas acima de 24 meses, provenientes de 246 rebanhos, e 2.766 animais amostrados aleatoriamente nos nove municípios que compõem a região do Pantanal de Mato Grosso do Sul, bem como identificados os fatores de risco associados à doença. As amostras de sangue foram coletadas no período de setembro a novembro de 2009 e examinadas pelo teste de aglutinação microscópica ante uma coleção de 24 antígenos vivos de Leptospira spp., representantes dos sorovares Australis, Bratislava, Autumnalis, Butembo, Castellonis, Batavie, Canicola, Whitcombi, Cynopteri, Grippotyphosa, Hebdomadis, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Javanica, Panamá, Pomona, Pyrogenes, Hardjo, Wolffi, Shermani, Tarassovi, Sentot, Andamana e Patoc. Adicionalmente, representantes de doze estirpes de leptospiras isoladas no Brasil foram adicionados à coleção de antígenos do teste de soroaglutinação microscópica (SAM). A prevalência aparente foi de 66% e a prevalência real de animais infectados, de 79,80%, com intervalo de confiança (IC) de 95% (78,3-81,3) e 241 rebanhos apresentando pelo menos um animal reagente. Os sorovares mais prováveis foram o Hardjo seguido pelo Wolffi. Os resultados demonstram que a leptospirose bovina continua presente no Pantanal, com alta prevalência tanto em rebanhos quanto em indivíduos, sendo os principais fatores de risco para a doença o tipo de exploração e a raça.(AU)

This is an epidemiological study of leptospirosis in 24 month-old females from 246 herds. Two thousand, seven hundred and sixty six (2,766) animals were randomly sampled in the nine counties comprising the region of Pantanal of Mato Grosso do Sul, Brazil. The risk factors associated with the disease were also identified. Blood samples were collected from September to November 2009 and examined by the microscopic agglutination test (MAT) against a collection of 24 live antigens of Leptospira spp., representatives of serovars Australis, Bratislava, Autumnalis, Butembo, Castellonis, Batavie, Canicola Whitcombi, Cynopteri, Grippotyphosa, Hebdomadis, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Javanica, Panama, Pomona, Pyrogenes, Hardjo, Wolffi, Shermani, Tarassovi, Sentot, Andamana, and Patoc. Additionally, twelve representatives of Leptospira strains isolated in Brazil were added to the collection of antigens for the microscopic agglutination test (MAT). The apparent prevalence was 66% and the actual prevalence of infected animals was 79.80%, with a confidence interval of 95% (78.3 to 81.3) and 241 herds having at least one reactive animal. The most likely serovars were Hardjo followed by Wolffi. Results show that bovine leptospirosis is still present in Pantanal, with high prevalence both in animals and herds, the main risk factors for the disease being the type of cattle farming and breeding.(AU)

ELISA based on recombinant MPB70 and P27 for detection of antibodies against Mycobacterium bovis

A tuberculose bovina é uma importante enfermidade causada pela bactéria Mycobacterium bovis. Testes de tuberculinização intradérmica e abate de animais infectados levaram à redução da incidência da tuberculose bovina em muitos países. Entretanto, são necessários métodos maispráticos e eficientes com maior sensibilidade e especificidade. O objetivo do presente estudo foidesenvolver um teste imunoenzimático (ELISA), utilizando as proteínas recombinantes MPB70 e p27 de M. bovis, que possibilitasse detectar anticorpos contra esta bactéria em bovinos. A sensibilidade e especificidade observadas foram, respectivamente, de 88,7por cento e 94,6por cento para o ELISA-MPB70 e de 98,1por cento e 91,9por cento para o ELISA-p27. O uso de testes sorológicos, como o ELISA com MPB70 e p27 recombinantes, juntamente com testes celulares, pode resolver algunsproblemas relacionados ao diagnóstico da tuberculose bovina tais como os resultados inconclusivos e a ausência de detecção de animais anérgicos em estágios avançados da infecção.

Survey of Leptospira spp in pampas deer (Ozotoceros bezoarticus) in the Pantanal wetlands of the state of Mato Grosso do Sul, Brazil by serology and polymerase chain reaction

This work reports a survey of Leptospira spp in pampas deer (Ozotoceros bezoarticus) in the Pantanal wetlands of the state of Mato Grosso do Sul, Brazil by serology and polymerase chain reaction (PCR). Seventy pampas deer were captured in the dry season and surveyed using PCR, microscopic agglutination test (MAT) (n = 51) and by both techniques (n = 47). PCR detected infections in two pampas deer and MAT detected infections in three. Through sequencing and phylogenetic analyses, the PCR-amplified fragment detected in deer was identified as Leptospira interrogans. Serovars Pomona and Butembo were detected using MAT and the highest titre was 200 for serovar Pomona. Epidemiological aspects of the findings are discussed.

Uso do ensaio imunoenzimático e imunoblotting para detecção de imunoglobulinas contra Campylobacter fetus em muco cérvico-vaginal de fêmeas bovinas / The use of enzyme-linked immunosorbent assay and immunoblotting for the detection of Campylobacter fetus immunoglobulins in the cervico-vaginal mucus of female cattle

Foi padronizado um ensaio imunoenzimático do tipo indireto para detecção de imunoglobulina A (ELISA IgA) anti- Campylobacter fetus subp. venerealis em muco cérvico- vaginal bovino utilizando um extrato protéico de Campylobacter fetus subsp. venerealis produzido pelo método de extração ácida pelo tampão de glicina (0,2M; pH2,2). A média dos valores de densidade ótica (DO450) foi de 0,143±0,09. As bandas protéicas dos antígenos de Campylobacter fetus subsp. venerealis e de Campylobacter fetus subsp. fetus melhor reconhecidas pela IgA do muco cérvico- vaginal migraram em 42,6 kDa mas a proteina evidenciada em 93 kDa foi reconhecida exclusivamente pelo Campylobacter fetus subsp. venerealis. Os anticorpos presentes na amostra de muco vaginal testada no “immunoblotting” que apresentou resultado positivo no ELISA IgA, reconheceu antígenos de C. jejuni subsp. jejuni e C. fetus subsp. fetus.

An indirect enzyme-linked immunosorbent assay was developed to detect antigenspecific secretory IgA antibodies to Campylobacter fetus subsp. venerealis in bovine vaginal mucus with a protein extract of the Campylobacter fetus subsp. venerealis by the acid glycine extraction method. Mean optical density measurement (λ=450 nm) was 0.143±0.9. The most immunoreactive protein bands of the Campylobacter fetus subsp. venerealis or Campylobacter fetus subsp. fetus recognized by IgA in immunoblotting, using bovine vaginal mucus samples, migrate at 42.6 kDa. The protein that migrates at 93 kDa was recognized exclusively for C. fetus subsp. venerealis. A positive vaginal mucus sample of a cow from negative herd recognized antigens of C. jejuni subsp. jejuni e C. fetus subsp. fetus.

Real time polymerase chain reaction to diagnose Anaplasma marginale in cattle and deer (Ozotoceros bezoarticus leucogaster) of the Brazilian Pantanal / Reação da polimerase em cadeia tempo real para diagnóstico de Anaplasma marginale em bovino e veado campeiro do Pantanal brasileiro Ozotoceros bezoarticus leucogaster

Epizootiological study of Anaplasma marginale in regions that contain various reservoir hosts, co-existence of rickettsia pathogens, and common vectors is a complicated task. To achieve diagnosis of this rickettsia in cattle and campeiro deer of Brazilian Pantanal, a comparison was made between a real time polymerase chain reaction (RT-PCR) with intercalating Sybr Green fluorochrome and primers based on msp5 gene of A. marginale; a conventional PCR (C-PCR); and parasitological examination using thin blood smear stained with Giemsa-MayGrunwald. Both PCRs showed good performance in the diagnosis of A. marginale in cattle, and were superior to the parasitological exam. The RT-PCR detected seven positive campeiro deer (16.3 percent). This rate was significantly higher compared to C-PCR, which identified one animal as positive (2.3 percent), and also compared to parasitological diagnosis, which did not find any positive animals. The dissociation temperature average of positive reactions in cattle (81.72 ºC ± 0.20) was identical to dissociation temperature found in the cervids (81.72 ºC ± 0.12), suggesting that both animal species were infected with A. marginale. We concluded that RT-PCR can be used for A. marginale diagnosis and in epizootiological studies of cattle and cervids; in spite of the small number of campeiro deer samples, the results indicated that this wildlife species has importance in the Anaplasma epizootiology in the Brazilian Pantanal.

O estudo epizootiológico de Anaplasma marginale em regiões que existem vários reservatórios, co-existência de espécies de riquétsias patógenas e vetores comuns é uma tarefa complicada. Com o objetivo de obter o diagnóstico dessa riquétsia em bovinos e veado campeiro do Pantanal brasileiro foi avaliada uma reação da polimerase em cadeia em tempo real (PCR-TR) com o fluoróforo intercalante de fita dupla de DNA Sybr Green e iniciadores baseados na seqüência do gene msp5 de A. marginale comparando-a a uma PCR convencional (PCR-C) e ao exame parasitológico de esfregaço fino de sangue corado com Giemsa-MayGrunwald. Ambas PCRs apresentaram bom desempenho no diagnóstico de A. marginale nos bovinos, o qual foi superior ao exame parasitológico. O PCR-TR detectou sete veados campeiros positivos (16,3 por cento), o que foi significativamente maior comparado ao PCR-C identificando um animal como positivo (2,3 por cento), e ao exame parasitológico não encontrou nenhum animal positivo. A média da temperatura de dissociação das reações positivas para amostras de bovinos (81,72 ºC ± 0,20) foi idêntica àquelas dos cervídeos ( 81,72 ºC ± 0,12), o que sugere que ambas espécies animais foram infectadas por A. marginale. Concluímos que PCR-TR pode ser utilizada para diagnóstico e estudos epizootiológicos de A. marginale em bovinos e cervídeos. Apesar da pequena amostragem de veado campeiro os resultados indicam que essa espécie de animal selvagem tem importância na epizootiologia do Anaplasma no Pantanal brasileiro.

Serologic evidence of the recent circulation of Saint Louis encephalitis virus and high prevalence of equine encephalitis viruses in horses in the Nhecolândia sub-region in South Pantanal, Central-West Brazil

As in humans, sub-clinical infection by arboviruses in domestic animals is common; however, its detection only occurs during epizootics and the silent circulation of some arboviruses may remain undetected. The objective of the present paper was to assess the current circulation of arboviruses in the Nhecolândia sub-region of South Pantanal, Brazil. Sera from a total of 135 horses, of which 75 were immunized with bivalent vaccine composed of inactive Eastern equine encephalitis virus (EEEV) and Western equine encephalitis virus(WEEV) and 60 were unvaccinated, were submitted to thorough viral isolation, reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and neutralization tests for Saint Louis encephalitis virus (SLEV), EEEV, WEEV and Mayaro virus (MAYV). No virus was isolated and viral nucleic-acid detection by RT-PCR was also negative. Nevertheless, the prevalence of neutralizing antibodies in horses older than seven months was 43.7 percent for SLEV in equines regardless of vaccine status, and 36.4 percent for WEEV and 47.7 percent for EEEV in unvaccinated horses. There was no evidence of MAYV infections. The serologic evidence of circulation of arboviruses responsible for equine and human encephalitis, without recent official reports of clinical infections in the area, suggests that the Nhecolândia sub-region in South Pantanal is an important area for detection of silent activity of arboviruses in Brazil.

Evidência molecular de brucella sp. em ozotoceros bezoarticus (veado campeiro) do Pantanal sul-mato-grossense / Molecular evidence of brucella sp. in deer (ozotoceros bezoarticus) of the southern Pantanal

A presença de Brucella spp. entre animais silvestres pode influenciar a taxa de reprodução destes hospedeiros, além de atuarem como fonte de infecção natural para os animais domésticos e humanos. O objetivo deste estudo foi identificar a presença de Brucella spp. em 44 amostras de sangue de veado campeiro (Ozotoceros bezoarticus) do Pantanal do Sul-Mato-Grossense, utilizando a técnica de PCR. Observou-se que 20,4 por cento (9/44) das amostras foram positivas. A sequência consenso de nucleotídeo obtida no sequenciamento do isolado de veado campeiro apresentou 514 pb e 95 por cento de identidade com virB5 de B. abortus (best hits acesso nr AF226278, e-value 0.0), já na análise filogenética a amostra de Brucella isolada de veado campeiro apresentou-se muito próximo de B. suis. A alta porcentagem de amostras positivas sugere que a brucelose pode ser um problema entre os veados campeiros na área estudada e que estes animais podem representar riscos para outros animais domésticos e silvestres.

The presence of Brucella spp. in wild animals can influence their reproduction rate and may be a source of infection for domestic animals and humans. The objective of this study was to identify the presence of Brucella spp. in 44 blood samples from the deer Ozotoceros bezoarticus in the southern Pantanal of Sul-Mato-Grossense, using the PCR technique. It was seen that 20.4 percent (9/44) of the samples were positive. The consensus sequence was obtained by sequencing these samples, which then showed 514 pb and 95 percent of identity with gene virB5 of B. abortus (best hits accession nr AF226278, e-value 0.0). The phylogenetic analysis of the sample isolated from deer revealed the Brucella to be very close to B. suis. The high percentage of positive samples suggests that brucellosis may be a concern in deer within the studied area, and that these animals may poses a risk for other domestic and wild ones.

Preliminary investigation of Culicidae species in South Pantanal, Brazil and their potential importance in arbovirus transmission / Investigação preliminar das espécies de culicídeos do Pantanal Sul brasileiro e sua potencial importância na transmissão de arbovírus

In view of the high circulation of migratory birds and the environmental and climatic conditions which favor the proliferation of arthropods, the Brazilian Pantanal is susceptible to circulation of arboviruses. However, the amount of data concerning arbovirus vectors in this area is scarce; therefore the aim of this study was to conduct a preliminary investigation of Culicidae species in the Nhecolândia Sub-region of South Pantanal, Brazil and their potential importance in the arbovirus transmission. A total of 3684 specimens of mosquitoes were captured, 1689 of which caught in the rainy season of 2007, were divided into 78 pools and submitted to viral isolation, Semi-Nested RT-PCR and Nested RT-PCR, with a view to identifying the most important arboviruses in Brazil. Simultaneously, 70 specimens of ticks found blood-feeding on horses were also submitted to the same virological assays. No virus was isolated and viral nucleic-acid detection by RT-PCR was also negative. Nevertheless, a total of 22 Culicidae species were identified, ten of which had previously been reported as vectors of important arboviruses. The diversity of species found blood-feeding on human and horse hosts together with the arboviruses circulation previously reported suggest that the Nhecolândia Sub-region of South Pantanal is an important area for arbovirus surveillance in Brazil.

Regiões como o Pantanal brasileiro, que apresentam fatores como riqueza de fauna silvestre incluindo circulação de aves migratórias e condições ambientais e climáticas favoráveis à proliferação de artrópodes estão potencialmente sujeitas à circulação de arbovírus. Entretanto, poucos trabalhos foram realizados acerca da presença de arbovírus em potenciais vetores no Pantanal. Neste sentido o principal objetivo deste trabalho foi conduzir uma investigação preliminar para presença de arbovírus em amostragens de culicídeos capturados na Sub-região da Nhecolândia no Pantanal Sul. Um total de 3684 mosquitos foi capturado, dos quais 78 grupos compondo uma amostragem de 1789 espécimes foram submetidos às técnicas de isolamento viral e RT-PCR para os mais importantes arbovírus no Brasil. Simultaneamente, 70 espécimes de carrapatos capturados durante hematofagia em cavalos também foram submetidos à pesquisa viral. Não houve isolamento viral em nenhuma amostra analisada e os resultados de detecção de ácido nucléico viral foram também negativos. Entretanto, foram identificadas 22 espécies de culicídeos, dez das quais previamente reportadas como vetores de importantes arbovírus. A competência vetorial de espécies capturadas durante hematofagia em humanos e cavalos aliada ao relato prévio de circulação de arbovírus sugerem a Sub-região da Nhecolândia como uma importante área de vigilância para arbovírus no Centro-Oeste do Brasil.

Prevalência e fatores de risco para a leptospirose em bovinos de Mato Grosso do Sul / Prevalence and risk factors for bovine leptospirosis in Mato Grosso do Sul, Brazil

Foi investigada a prevalência de anticorpos antileptospira em fêmeas bovinas com idade igual ou superior a 24 meses, provenientes de 178 rebanhos de 22 municípios do estado de Mato Grosso do Sul, bem como identificados fatores de risco associados à infecção. Foram analisadas 2.573 amostras de soro sangüíneo por meio do teste de soroaglutinação microscópica perante 10 sorovares de leptospira. Títulos iguais ou superiores a 100 para um ou mais sorovares foram detectados em 1.801 fêmeas (98,8 por cento) de 161 (96,5 por cento) rebanhos. O sorovar Hardjo (65,6 por cento) foi apontado como o mais provável, seguido do sorovar Wolffi (12,3 por cento). Os resultados demonstram que a leptospirose bovina se encontra presente em todos os municípios estudados, com alta prevalência, tanto em animais como em rebanhos. Os fatores de risco identificados neste estudo e associados à infecção por bactérias do gênero lepstopira foram o tipo de exploração pecuária de corte e a raça Zebu.

The prevalence of anti-Leptospira spp. antibodies was estimated for female cattle aged 24 months or older. The sample comprised 178 herds from 22 counties in the state of Mato Grosso do Sul, Brazil. The risk factors associated with the presence of infeccion were investigated. A total of 2,573 blood serum samples were tested against 10 leptospira serovars using the microagglutination test (MAT). Titers of 100 or higher for one or more serovars were detected in 1,801 females (98.8 percent) from 161 herds (96.5 percent). Serovar Hardjo (65.6 percent) was the most frequent, followed by serovar Wolffi (12.3 percent). These results suggest that bovine leptospirosis is widespread in all the counties under study, with a high prevalence both at the animal and the herd level. Beef farms and the Zebu breed were associated to the higher risk of herd infection by leptospiras.

Leptospirosis serosurvey in bovines from Brazilian Pantanal using IGG ELISA with recombinant protein LipL32 and microscopic agglutination test

This investigation was carried out in Brazilian Pantanal: region with important biodiversity. This region's climatic conditions, hydrology and geomorphology as well as the existence of great variety of wild species favor the maintenance of the Leptospira in the environment. The aim of this study was to evaluate IgG ELISA with recombinant protein LipL32 in comparison with microscopic agglutination test (MAT) and additionally contribute to the knowledge of the distribution of the one of most important worldwide zoonotic infection, assessing the seropositivity of bovine leptospirosis in beef cattle herds of Brazilian Pantanal, an important ecological preserved area, where cattle constitute not only the most important economic resource but also the major activity compatible of the conservation of natural resource of the region. Out of 282 samples of cattle serum analyzed, 143 (50.71 percent) were positive in MAT. The serovar Hardjo (genotypic Hardjoprajitno and Hardjobovis), Wolffi and Ballum showed the largest frequency of reactive samples. In the IgG ELISA rLipL32, 161 samples (57.09 percent) were positive. This result was higher than obtained by MAT (p<0.001). The sensitivity of the ELISA test was 99.30 percent and the specificity was 86.33 percent, based on the MAT. This test was shown to be a more sensitive, specific and accurate test for the diagnosis of bovine leptospirosis compared to the MAT.

Este estudo foi realizado no Pantanal brasileiro: região que apresenta importante biodiversidade. As condições de clima, hidrologia e geomorfologia dessa região, bem como a existência de grande variedade de espécies animais silvestres, favorecem a manutenção da Leptospira no meio ambiente. O objetivo desse estudo foi avaliar o ELISA IgG com proteína recombinante LipL32 em comparação com a soroaglutinação microscópica (SAM) para o diagnóstico sorológico de Leptospira. Adicionalmente, contribuir para o conhecimento da distribuição da leptospirose bovina, uma das mais importantes zoonoses mundialmente distribuída. Foi avaliada a soropositividade para essa bactéria em rebanhos bovinos de corte da região do Pantanal, uma área onde o bovino constitui não apenas o recurso econômico mais importante, como também a principal atividade econômica compatível com a conservação dos recursos naturais da região. Das 282 amostras de soro bovino analisadas, 143 (50,71 por cento) foram positivas na SAM. O sorovar Hardjo (genótipos Hardjoprajitno e Hardjobovis), Wolffi e Ballum apresentaram freqüências altas de amostras reativas. No IgG ELISA rLipL32, 161 amostras (57,09 por cento) foram positivas, apresentando esse teste uma maior soropositividade em relação à SAM (p<0,001). A Sensibilidade do ELISA em comparação com a SAM foi de 99,30 por cento e a especificidade de 86,33 por cento. O IgG ELISA rLipL32 mostrou ser um teste sensível, específico e de alta acurácia para o diagnóstico de leptospirose bovina.

Investigação epidemiológica da brucelose bovina em um estrato do Estado de Mato Grosso do Sul / Epidemiological investigation of bovine brucellosis in an extract of Mato Grosso do Sul, Brazil

O objetivo deste estudo foi estimar a prevalência da brucelose bovina nos 22 municípios que compõem a região denominada Estrato 1 do Estado de Mato Grosso do Sul, e identificar os fatores de risco associados à infecção. A região amostrada constitui uma área de 70.214,1 km2, que representa 19,7% do Estado. O rebanho de região estudada é de, aproximadamente, 5,7 milhões de cabeças, correspondente a 23% do efetivo de 24,9 milhões de bovinos de Mato Grosso do Sul. Nas 210 propriedades amostradas, no período de dezembro de 2003 a março de 2004, foram colhidas 2.376 amostras de sangue de fêmeas com idade igual ou superior a 24 meses, submetidas a testes diagnósticos em série. A triagem, realizada por meio do teste do antígeno acidificado tamponado, foi seguida pelo teste confirmatório 2-mercaptoetanol. Na mesma ocasião da colheita das amostras, foi preenchido um questionário com informações de identificação, tipo de criação e práticas de manejo. Em animais, a prevalência real foi estimada em 5,6%, e em rebanhos, 37,3%. As variáveis que apresentaram associação, por meio da análise univariada odds ratio (OR) e intervalo de confiança (IC) de 95%, com a soropositividade à brucelose foram: o tipo de exploração corte (OR = 2,82, IC 95% = 1,49-5,34), a raça Zebu (OR = 2,62, IC 95% = 1,40-4,88) e o aborto (OR= 1,83, IC 95% = 1,01-3,33). Os resultados demonstram que, além da brucelose ser prevalente no estrato estudado em Mato Grosso do Sul, o controle da doença pode consistir na adoção de programa com especial atenção à exploração do tipo corte, à raça Zebu e à presença do aborto.

The study aimed to estimate the prevalence of bovine brucellosis in 22 counties which make up the region Extract 1 of the State of Mato Grosso do Sul, Brazil, in order to identify risk factors associated with the infection. The sample region encompasses an area of 70,214.1 km2 and represents 19.7% of the State. The region studied has about 5.7 million head of cattle, corresponding to 23% of the total of 24.9 million cattle in the State of Mato Grosso do Sul. On 210 farms, between December 2003 and March 2004, 2,376 blood samples were collected from cows, aged 24 months or older, for serial diagnostic tests. Screening through the buffered acidified antigen test was confirmed by the 2-mercaptoetanol test. On the occasion of sample collection a questionnaire with information related to identification, kind of cattle and management practices was filled out. In individual animals the real prevalence was estimated at 5.6%, and in the cattle herds at 37.3%. The variables, which presented association through odds ratio (OR), univariate analysis and 95% confidence interval (CI) with serum positivity for brucellosis, were: the exploration of beef cattle (OR = 2.82, 95% CI = 1.49-5.34), Zebu breed (OR = 2.62, 95% CI = 1.40-4.88) and abortion (OR = 1.83, 95% CI = 1.01-3.33). The results shown here demonstrate, despite the prevalence of brucellosis in the extract of Mato Grosso do Sul studied, that the control of the disease may depend on adoption of a program focusing upon the exploration of beef cattle, the Zebu breed and the occurrence of abortion.

Testes de diagnóstico para o vírus da leucemia bovina

A reação em cadeia da polimerase (PCR), uma nested-PCR (nPCR) um teste imunoenzimático (ELISA) e a imunodifusão emgel de agar (IDGA) foram utilizados para identificar bovinos Pantaneiros naturalmente infectados pelo vírus da leucemia bovina(BLV), e os resultados dos quatro testes comparados. A concordância entre os testes foi de 86,2%, 70,0% e 62,5%, respectivamentepara ELISA/IDGA, IDGA/PCR e ELISA/PCR. A nPCR amplificou DNA proviral de 12 amostras negativas à PCR e de quatrobovinos com resultados negativos em testes sorológicos; entretanto, não amplificou o DNA proviral de quatro amostras debovinos soropositivos.